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1、HEPG2人肝癌細(xì)胞 該細(xì)胞系來(lái)自15歲男性白人的組織。形態(tài)為上皮形,模式染色體數(shù)為55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。 培養(yǎng)建議: 1、部分細(xì)胞傳代后細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)黑色小點(diǎn),細(xì)胞間隙內(nèi)出現(xiàn)少量顆粒物或者培養(yǎng)基中浮游著少量死細(xì)胞等均為正?,F(xiàn)象,對(duì)細(xì)胞的增殖及試驗(yàn)無(wú)影響??梢晕ゼ?xì)胞懸液后用PBS進(jìn)行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化細(xì)胞重新接種,如果碎片較多,建議用PBS多清洗幾遍。 2、細(xì)胞復(fù)蘇或傳代后會(huì)有少部分的細(xì)胞貼壁和部分懸浮的細(xì)胞,復(fù)蘇兩天后細(xì)胞會(huì)從貼壁細(xì)胞向外開始生長(zhǎng),有時(shí)細(xì)胞在生長(zhǎng)過(guò)程中,細(xì)胞會(huì)在貼壁細(xì)胞的上方生長(zhǎng),形成不同的細(xì)胞層,這種情況會(huì)有發(fā)生;細(xì)胞傳代處理后的第二天,在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),如死細(xì)胞較多且細(xì)胞密度較低,需要進(jìn)行換液操作,也可視情況穩(wěn)定。 3、細(xì)胞傳代后細(xì)胞有漂浮是正?,F(xiàn)象,培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)逐漸貼壁,若覺(jué)得細(xì)胞貼壁或生長(zhǎng)較緩慢可酌情提高血清含量,總血清含量不要超過(guò)20% 4、在細(xì)胞復(fù)蘇的一周內(nèi),培養(yǎng)瓶中通常會(huì)有懸浮的活的細(xì)胞團(tuán),在換液過(guò)程中不要丟棄在這些活的懸浮細(xì)胞,可以通過(guò)離心回收細(xì)胞,重新打回到培養(yǎng)瓶中,分離或者丟棄漂浮的活細(xì)胞會(huì)使細(xì)胞數(shù)量變少,引起細(xì)胞的停滯生長(zhǎng)或細(xì)胞死亡; 5、培養(yǎng)條件的細(xì)微變化,尤其是pH和培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量,可能會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況; 6、在細(xì)胞的生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)有細(xì)胞內(nèi)的液泡出現(xiàn),特別在細(xì)胞快要融合是會(huì)出現(xiàn)這種情況。 圖1 BC-C-HU-024 2、LX-2人肝星形細(xì)胞 該細(xì)胞系由發(fā)表該細(xì)胞文章的第一作者命名,這個(gè)細(xì)胞又叫Lieming Xu-2,這是一個(gè)永生化的細(xì)胞。 培養(yǎng)建議: 1、細(xì)胞外的黑色顆粒大部分是細(xì)胞碎片,可以吸去細(xì)胞懸液后用PBS進(jìn)行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化細(xì)胞重新接種,如果碎片較多,建議用PBS多清洗幾遍。 2、注意控制傳代密度,低密度時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)較慢。 3、細(xì)胞傳代處理后的第二天,在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),如死細(xì)胞較多且細(xì)胞密度較低,需要進(jìn)行換液操作,也可視情況穩(wěn)定。 4、細(xì)胞生長(zhǎng)偏慢,倍增時(shí)間為48-96,注意控制傳代密度,推薦傳代比例1:2-1:4。 5、使用本公司BC-CE-005胰酶消化1-2min即可。 圖2 BC-C-HU-055 3、Hsc-T6大鼠肝星形細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞是一種來(lái)源于大鼠的肝星狀細(xì)胞系,被廣泛用于研究肝臟生物學(xué)、肝纖維化以及相關(guān)疾病的機(jī)制。該細(xì)胞具有與原代肝星狀細(xì)胞相似的特性,包括對(duì)維生素A代謝的參與。HSC-T6細(xì)胞能夠攝取和酯化視黃醇,并且表達(dá)所有六種視黃酸核受體(RARalpha, -beta, -gamma和RXRalpha, -beta, -gamma),這表明它們?cè)谝朁S酸代謝方面具有重要的功能。 此外,HSC-T6細(xì)胞也被用作研究肝纖維化過(guò)程中的關(guān)鍵細(xì)胞模型。例如,TGF-β1處理可以促進(jìn)HSC-T6細(xì)胞的增殖和膠原蛋白分泌,從而加劇肝纖維化的進(jìn)程。這一點(diǎn)通過(guò)觀察到的α-SMA和COLⅠ等膠原蛋白標(biāo)志物的表達(dá)增加得到了證實(shí)。 HSC-T6細(xì)胞還被用于研究細(xì)胞凋亡和自噬等細(xì)胞死亡過(guò)程。例如,油酸誘導(dǎo)的Sptlc2基因高表達(dá)可以促進(jìn)HSC-T6細(xì)胞的凋亡和自噬。這表明HSC-T6細(xì)胞可以作為研究細(xì)胞凋亡和自噬調(diào)控機(jī)制的有效工具。 在藥物篩選和治療策略開發(fā)方面,HSC-T6細(xì)胞也顯示出其價(jià)值。例如,復(fù)方861能夠提高M(jìn)MP3 mRNA表達(dá)水平,可能是其抗肝纖維化作用的一部分。此外,化肝煎含藥血清能顯著抑制HSC-T6的增殖,并對(duì)TGF-β1、CTGF及MAPK1 mRNA表達(dá)表現(xiàn)顯著抑制作用,這可能與其抗肝纖維化的作用有關(guān)。 圖3 BC-C-RA-001 肝癌細(xì)胞研究涵蓋了從基礎(chǔ)生物學(xué)特性到臨床治療方法的廣泛領(lǐng)域。未來(lái)的研究需要進(jìn)一步探索肝癌干細(xì)胞的來(lái)源、表面標(biāo)志、分選方法及其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用,同時(shí)深入研究免疫治療、腫瘤微環(huán)境、納米技術(shù)和腫瘤自噬等新興治療策略的應(yīng)用前景和機(jī)制。此外,了解肝炎與肝癌發(fā)生的分子機(jī)制也是未來(lái)研究的重要方向之一。