英文名稱：B16-F10
中文名稱：小鼠皮膚黑色素瘤細胞
種 屬：鼠源
組織來源：器官；皮膚；品系：C57BL/6J；疾??；黑色素瘤
生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)：梭形細胞樣；上皮細胞樣
傳代比例：1:2 ~ 1:4
換液頻率：2~3次/周
倍增時間：48-72h
培養(yǎng)體系：DMEM（高糖）+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)條件：5%CO2；37 ℃
凍存條件：Biochannel細胞凍存液，程序降溫，液氮長期保存。
【細胞培養(yǎng)特點】
1. 該細胞在DMEM(含1.5g/L NaHCO3)培養(yǎng)基中生長良好，大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/LNaHCO3）培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞時需要提高CO2濃度（7%-10%）。
2. 該細胞我們推薦的基礎培養(yǎng)基是DMEM（高糖）培養(yǎng)基；
3. 據(jù)反映DMEM養(yǎng)B16-F10，細胞會很黑，分泌黑素量比較多；而1640養(yǎng)比較白，黑素分泌量比較少。（依據(jù)實驗需求可嘗試更換培養(yǎng)體系，更換時建議留種）；
4.更換為DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)時，請保證血清和培養(yǎng)液質量，不然營養(yǎng)問題會導致細胞不長、生長緩慢以及黑色素大量分泌。
【常見問題】
Q: 收貨時細胞出現(xiàn)偽足，或是碎片較多怎么辦？
A：受到運輸影響，懸浮細胞會短暫性出現(xiàn)形態(tài)改變的現(xiàn)象，如偽足等。通過傳代培養(yǎng)，1周左右可以恢復正常。一些細胞在運輸途中死亡而產生碎片，通過傳代離心可以去除（見上文傳代篇）。
Q：培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生貼壁怎么辦？
A: 少量細胞貼壁屬于正常情況，將細胞懸液轉移至新瓶中即可。當貼壁細胞的比例高于20%，說明細胞生長環(huán)境有異常，需排查培養(yǎng)箱設置、培養(yǎng)基成分，以及培養(yǎng)器皿是否異常。
Q：培養(yǎng)過程中細胞發(fā)生聚團怎么辦？
A：少量細胞聚團，呈葡萄串狀，屬于正?，F(xiàn)象，特別是細胞密度較低時，易出現(xiàn)這種情況。更換血清品牌或增大血清比例（不超過20%）有助于解決聚團問題。不建議將聚團的細胞吹散，等待密度高時，會自己分散開。
Q：培養(yǎng)基里一定要加β-巰基乙醇嗎？
A：β-巰基乙醇是一種常用的培養(yǎng)補充劑，有抗氧化的作用，可減少氧化應激對THP-1細胞的影響。當細胞密度過大但需要維持時，可適當增加巰基乙醇的比例（不超過標準量的1.5倍）。
Q：鏡下觀察時，難以聚焦或估算密度怎么辦？
A：懸浮細胞會隨著液體流動，不容易聚焦，靜置5-10min使細胞沉底，之后在輕輕放上顯微鏡觀察，將有助于聚焦和估算細胞密度。
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