雞的采血
01、心臟采血
雞右側臥自然保定,從膝關節(jié)稍前下方處垂直地面進針采血。
要點:
(1)采血前雞盡可能處于自然狀態(tài)。
(2)垂直地面進針:刺入正確時,松開注射器,會看到注射器隨心臟的自然跳動。
(3)先把針全部刺入,如采不出,可以一邊向上提注射器,一邊采血,注意向上提注射器時速度要慢。
02、翅靜脈采血
(1)捏住近心端,讓翅靜脈臌起。
(2)針頭斜面向上,小角度刺入翅靜脈中,待出現(xiàn)回血時,松開近心端,固定好針頭進行采血即可。
雞紅細胞如何制備?
把采集過動物血液的采血管依次放入卡套內,并將放置于離心機對角線的兩個卡套配平,使其重量相同(相差不超過0.2g),低溫離心機4000r/min,離心10分鐘。離心機的使用參照離心機的操作規(guī)程。
1.1 于超凈臺內采集上清液置于無菌血清瓶中即為血漿(不同的抗凝劑需做好標記),-20℃冷凍保存于固定區(qū)域
1.2 小心吸取紅細胞上方的白細胞層,并棄去。
1.3 在每根吸除過白細胞的采血管中,加入和壓積紅細胞等體積的無菌1×PBS,并輕輕吹打混勻。
1.4 將混勻好的紅細胞懸液轉至15ml無菌離心管中,低溫離心機2000r/min離心10分鐘。
1.5 吸取上清液并棄去。
1.6 加入和壓積紅細胞等體積的無菌1×PBS,并輕輕吹打混勻。低溫離心機2000r/min離心10分鐘。重復1.5-1.6步驟一次,吸取上清液并棄去即為紅細胞原液。
保存方法
(1%雞紅細胞保存條件:2-8℃,30天)
注意事項:
注意不要凍融
每天需上下輕輕顛倒混勻
注意無菌操作
2-8℃保存,盡快使用
盡量避免劇烈震蕩
常見問題
【全溶血】溶液澄明,紅色,管底無紅細胞殘留
【部分溶血】溶液澄明,紅色或棕色,底部有少量紅細胞殘留;鏡檢紅細胞稀少或變形?
【不溶血】紅細胞全部下沉,上清液體無色澄明;鏡檢紅細胞不凝聚
【紅細胞凝聚】溶液中有棕紅色或紅棕色絮狀沉淀,振搖后不分散
1、由于抽血困難,采血時定位進針不準、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。
2、注射器和針頭連接不緊,采血時空氣進入,或動物緊張導致血流不暢,抽血時間過長,都會導致血標本中混有泡沫,這種混有泡沫的血標本,放置一定時間后泡沫破裂或迅速干燥,造成血細胞破壞而發(fā)生溶血。
4、不合格的塑料制品會因聚合不完全而具有毒性,這種毒性可造成溶血。
5、試管質量粗糙。
6、抽血消毒時,酒精未干就進行抽血。
7、操作過程中,可能引入的動物的毛發(fā),而導致溶血。
(雞紅細胞鏡下圖)