【貨號】 BL-O010

【規(guī)格】 500mL

【保存】 10~30℃，12個月。

【產(chǎn)品簡介】

在組織切片過程中，一些含鈣組織不能直接制作切片，因為鈣和石蠟的密度不同，較難切出完整的切片。為達到骨組織既充分脫鈣，又保護組織的抗原不受破壞，需要對含鈣組織固定之后再進行脫鈣或采用固定兼有脫鈣的液體處理，然后再進行常規(guī)制片。用于脫鈣的試劑很多，脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)等。EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑，對組織結構影響最小，可以較好的保存組織的某些酶類，經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢，一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。

EDTA 脫鈣液主要由EDTA、磷酸鹽等組成，pH值為7.2。EDTA脫鈣液的特點是組織染色結果好，對組織的結構損害小。但是EDTA脫鈣速度很慢，且脫鈣后組織會稍微變硬。

【使用方法】

1、骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約5mm。

2、組織固定后，用PBS清洗3次，每次20min。

3、組織用蒸餾水洗清洗3次，每次20min。

4、組織轉(zhuǎn)移至20~30倍體積的EDTA 脫鈣液中，脫鈣10~30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度，可以置于37℃進行脫鈣。如果必要，更換新的EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣，多數(shù)組織脫鈣2周～3個月即可，每周更換一次直至終點。

5、用蒸餾水沖洗數(shù)次。

6、常規(guī)脫水、包埋。

 

【注意事項】

1、厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。

2、適當加溫能加快脫鈣的速度，一般不應超過 37~40℃，溫度過高容易使骨組織造成松散解體，尤其不可大于 60℃。

3、脫鈣應徹底，防止脫鈣不足或過度。不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間，每隔一段時間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會增加組織的損傷程度，影響染色結果。以免脫鈣過長引起組織損害。

4、脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。

5、骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或固定、脫鈣同時進行，不應先脫鈣后固定，以便減少組織的損傷程度。

6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。